在实验中的应用

鸡骨是肉鸡加工产业的主要副产物，资源利用率低、附加值不高，抗氧化肽是其高值化开发的核心方向，不同分子量肽段的抗氧化活性差异显著，精准分级分离是挖掘高活性鸡骨肽的关键前提。

本研究采用山东博纳生物科技集团有限公司生产的 BONA-GM-18H有机膜分离实验机，开展鸡骨抗氧化肽的分级分离研究。实验先通过 博纳科技微滤膜去除枯草芽孢杆菌发酵液中的大分子杂质，再依次采用不同截留分子量的 博纳科技超滤膜对澄清滤液进行分级分离，获得1~10 kDa不同分子量段的鸡骨抗氧化肽组分。

经活性检测，1~10 kDa区间的肽段均表现出优异的抗氧化活性，各组分DPPH自由基清除率均达50%以上，ABTS+自由基清除率均达89%以上，为高活性鸡骨抗氧化肽的规模化制备提供了核心设备与工艺支撑。

膜过滤优势

适配发酵液体系分级需求，可通过多级超滤膜实现不同分子量鸡骨抗氧化肽的精准分级，组分分子量均一性好，分离过程无活性成分损失。

纯物理常温错流过滤工艺，无相变、无化学试剂添加，不破坏抗氧化肽的分子结构与生物活性，完整保留其自由基清除能力。

设备采用连续化错流过滤设计，可有效缓解发酵液中蛋白、胶体等物质造成的膜污染，运行过程中膜通量稳定，分离效率高，适配规模化连续生产需求。

工艺参数可调性强，可灵活适配不同分子量活性肽的分离需求，批次间分离效果稳定性好，相较于传统层析法大幅缩短分离周期，降低生产成本。

参考文献

《枯草芽孢杆菌发酵法制备鸡骨抗氧化肽的工艺优化》

李朋泰 张家培 刘亚慧 牛占占 赵腾腾 孙少康 赵祯 王志新

河北科技大学食品与生物学院

摘要

为增强畜禽加工副产品的综合利用价值，研发高附加值新产品，以鸡骨为原料，通过枯草芽孢杆菌发酵法制备鸡骨抗氧化肽，以OD值为指标，确定葡萄糖添加量对枯草芽孢杆菌生长的影响，以抗氧化性和水解度为评价指标，探究鸡骨粉添加量、培养基初始pH值、菌种接种量、装液量和培养时间对发酵鸡骨制备抗氧化肽的影响，以抗氧化性为评价指标通过响应面试验探究最优发酵条件；并对发酵液进行膜分离，对不同分子量的组分进行抗氧化活性测定，同时通过扫描电子显微镜观察发酵前后鸡骨粉形态结构变化。结果表明，培养基中不添加葡萄糖时枯草芽孢杆菌长势更好。优化后的最佳发酵条件为鸡骨粉添加量3.2%、培养基初始pH6、菌种接种量4.0%、装液量59 mL/250 mL、培养时间20 h。在此条件下，DPPH·清除率为69.55%，水解度为77.93%。经过膜分离得到的组分中，分子量1～10 kDa的肽段均表现出良好的抗氧化活性，各组分的DPPH·清除率均达到50%以上；ABTS+·清除率均达到89%以上；邻苯三酚自氧化速率均在20%以上。扫描电子显微镜结果显示，鸡骨粉形态结构发生改变，表面出现凹陷破损，判断鸡骨粉已被水解。

微滤膜	超滤膜	BONA-GM-18