在实验中的应用

造血活性小肽是阿胶的核心功效物质，不同分子量肽段的生物活性差异显著，精准分级分离是明确阿胶炮制原理、挖掘其活性物质基础的核心前提。

本研究采用山东博纳生物科技集团有限公司生产的 BONA-GM-18型有机膜分离实验机，开展阿胶及其炮制品酶解液中活性小肽的分级分离研究。实验设定操作压力0.15±0.01 MPa、料液温度40 ℃，以 博纳科技1 kDa超滤膜为分离介质，对阿胶酶解液进行超滤分级，成功获得<1 kDa、1~10 kDa两类活性肽组分，为后续肽序列解析、造血活性验证及阿胶炮制原理研究提供了高纯度样品基础，明确了阿胶炮制后造血活性提升与特征活性肽生成的关联机制。

膜过滤优势

适配活性肽分级分离需求，可通过不同截留分子量超滤膜实现阿胶酶解液中活性小肽的精准分级，组分分子量均一性好，分离过程无交叉污染。

纯物理常温错流过滤工艺，无相变、无化学试剂添加，不破坏活性肽的分子结构与生物活性，完整保留阿胶肽的造血功效。

设备运行稳定，可连续化处理阿胶酶解液，分离效率高，相较于传统层析法大幅缩短分离周期，降低活性成分损失。

工艺参数可控性强，批次间分离效果稳定性好，可直接实现从实验室研发到工业化生产的线性放大，适配阿胶活性肽的规模化制备需求。

参考文献

《基于造血活性小肽研究阿胶炮制原理》

付英杰 司子林 刘月 贾玉民 陈智 陈小天 王建安

济宁医学院药学院 中国药科大学药学院 江西中医药大学药学院 东阿阿胶股份有限公司 山东中医药大学药学院

摘要

目的：基于造血活性小肽研究阿胶炮制原理。方法：Orbitrap-MS法对阿胶及其炮制品(蛤粉炒、蒲黄炒)的酶解-超滤物进行数据解析，根据分值、丰度、韦恩图、热图聚类分析推断其可能具有造血活性或具有深入研究价值的肽序列。采用Fmoc固相合成法对其进行合成，检测纯度、三氟乙酸残留、净肽含量、内毒素等。以红细胞爆式集落形成单位为指标，检测阿胶及其炮制品的酶解-超滤物和13种合成肽活性。结果共检测出171种肽，其中127个来源于胶原蛋白。蛤粉炒阿胶26种新肽产生，21种肽消失；蒲黄炒阿胶16种新肽产生，52种肽消失，多数肽序列保持不变，但丰度有所改变。以其中13种肽作为对象进行Fmoc合成，发现其均可用于细胞培养。结论：阿胶炮制后，造血活性升高，推测是胶原蛋白裂解并经消化产生ejp33(GVVGLPGQR)强活性肽、ejp131(GPAGPSGPPGKDGT)弱活性肽以达到增效作用，且其促造血效果是以ejp10(GPAGPIGPV)、ejp6(GPAGPTGPV)、ejp77(LSSPARSGASL)为主的数种肽的协同作用。

超滤膜	BONA-GM-18	超滤膜工业系统