本文采用先调pH再超滤的方法,对发酵液进行预处理,去除杂蛋白。
具体操作如下:
发酵液4500 r/min离心15min,收集上清液,向上清液中加入5 mol/L氢氧化钠,调pH至8.5。静止30min后离心。
离心上清液再通过山东博纳生物科技集团有限公司的卷式膜超滤小型试验机进行超滤,使用的是博纳科技的5KD的聚砜超滤膜,截留杂蛋白。
发酵液中的大量杂蛋白可以被博纳科技的超滤膜截留去除,同时ε-聚L-赖氨酸浓度变化不大,收率为95.83%。
后续采用离子交换树脂法分离聚赖氨酸,丙烯酸系列的弱酸型阳离子交换树脂HD-2吸附和解析性能较好;采用LT-720活性炭对离子交换液进行脱色,脱色率达到68%;采用乙醇、乙醚沉淀和冷冻干燥得到淡黄色粉末,纯度81.30%,回收率75%。
博纳科技5KD的聚砜超滤膜,可实现发酵液中杂蛋白的脱除,同时低分子量聚赖氨酸的透过。
发酵液离心上清经超滤处理后,上样离子交换树脂,可避免蛋白大分子色素对离子交换树脂的污染,有利于提高离子交换树脂的上样量,提高树脂利用率。
《发酵液中ε-聚L-赖氨酸提取工艺的研究》
刘延岭邓林
对发酵液中的ε-聚L-赖氨酸提取工艺进行了研究,着重探讨了发酵液预处理、离子交换和脱色三个关键单元操作技术。采用先调pH至8.5再使用5kD聚砜超滤膜过滤处理发酵液,除去其中大量杂蛋白。选择弱酸型HD-2树脂对滤液进行离子交换,树脂吸附和解吸性能良好。使用活性炭LT-720作为脱色剂对离子交换液进行脱色处理,条件为活性炭添加量为4%(w/v),脱色时间90min,脱色温度80℃的条件下,脱色率达到89.6%。通过乙醇和乙醚沉淀及真空冷冻干燥后得到的ε-聚L-赖氨酸浅黄色粉末产品纯度为81.30%,回收率为75%。
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| 超滤膜 | 卷式膜超滤小型实验机 |

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